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分离的早期卵泡培养

早期卵泡的体外培养技术可以在整个培养阶段连续研究单个卵泡,而且能研究特定物质与卵泡发育的关系。

关于早期卵泡体外培养已经做了很多研究,且早期卵泡能培养发育到不同阶段(45~47)。不过,该研究主要在大型哺乳动物中开展,包括山羊(48)、绵羊(49~51)、牛(52~56)和猪(57~59)。

EGF和bFGF能维持山羊的窦前卵泡(preantralfollicle)存活,而胰岛素样生长因子Ⅰ不能维持山羊窦前卵泡存活但能激活卵泡的生长。胰岛素、促卵泡素、胰岛素样生长因子、表皮生长因子、胰岛素样生长因子Ⅱ和血管内皮生长因子能激活牛窦前卵泡的发育(54,56,60)。

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胰岛素样生长因子和表皮生长因子能促进猪卵泡颗粒细胞增生并抑制窦前卵泡的凋亡(表3.2)。

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卵巢组织的来源、特性和利用

卵巢皮质储存着大量的原始卵泡,是体外成熟培养中未成熟卵子的主要来源。研究用的人卵巢皮质经主要获得途径有:经病人同意在子宫切除术或者卵巢切除术中(12,46,47)、绝育女性做腹壁部分切

除术或者腹腔镜手术中(14,45,46)和在剖宫产时做卵巢活检获得。除了这种有限的卵巢组织境外合法辅助介入,变性者(女性变男性)也是卵巢皮质组织的一个潜在来源(62)。

胎儿卵巢(妊娠晚期流产女婴)和青春期前的女孩卵巢组织单位面积的原始卵泡最多,也是卵泡的来源。

成年女性病人卵巢皮质中原始卵泡的分布不均匀且随着女性年龄增加的卵泡密度降低,因此在研究比较不同培养条件对人卵泡的影响时,胎儿卵巢和青春期前的女孩卵巢组织被普遍认为原始卵泡的最理想的来源。

胎儿卵巢和青春期前的女孩卵巢组织中丰富的原始卵泡确实能更好地说明不同培养条件对卵泡的影响。因此,许多研究偏爱将胎儿卵巢组织作为卵泡来源(16~18)。

由于人和大型动物整个卵巢体积较大,将其整个培养时营养物质不能在卵巢不同区域顺利传导,气体交换困难且随着代谢废物的积聚经常导致卵巢坏死,因此不能将整个卵巢进行培养。

鉴于此,经常将大型哺乳动物卵巢皮质切成薄片进行培养。培养卵巢组织的优点在于其不仅能保存结构完整的组织,还使得卵巢间质和卵泡能进行相互的物理作用。

如果女性朋友的卵泡发育不成熟,是无法去跟精子结合的。试管婴儿的妊娠率因此会受到影响并且降低,甚至会直接造成失败。

在试管婴儿促排的环节,需要等待卵泡生长发育到一定程度,如果当直径是2或者是3个以上的卵泡,其直径已经发育生长得大于1.8到2厘米的时候,雌激素的水平跟女性卵泡的数量相符的时候,这时的卵子就具有发育成熟的能力了。医生在这个时候就可以注射人绒毛促性腺激素促使卵泡内卵子成熟。

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女性卵子的发育成熟时间大约是在36小时到40小时左右,注射人绒毛促性腺激素以后,必须要在35小时到36小时内将卵子取出。

前一阶段药物的使用通常只能使卵子发育长大, 只是这样的话无法获得到发育成熟的卵子。为了评价卵泡当中卵子是不是真的具有发育成熟的能力,医生必须使用超声仪对于卵泡体积的大小进行监测,同时还要配合着检查血液当中的雌激素的水平。

而有一些女性排出的卵泡本身并是不成熟的,特别是对于多囊卵巢综合征患者来说,她们更易发生这类现象。未成熟卵子是不能够用于体外受精的,那这种情况下到底该怎么办呢?

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可以采用未成熟卵子体外培养技术,采用新的卵子采集及培养技术并结合传统的试管婴儿助孕技术来进行治疗。过程当中促排卵药物使用量相对来说会更少,特点是花费少而且安全性高、能够降低或避免促排卵药物所造成的不良反应,能够很好地避免多囊卵巢综合征(PCOS)患者在进行促排卵的过程当中所发生的卵巢过度刺激(OHSS)的问题。

(来源:《不孕症与辅助生殖》)

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参考资料